АССОЦИАЦИЯ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА PCSK9 С ПОКАЗАТЕЛЯМИ ЛИПИДНОГО ПРОФИЛЯ В РОССИЙСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ

Семейная гиперхолестеринемия входит в число наиболее распространенных врожденных метаболических нарушений. Мутации генов LDLR , APOB , PCSK9 определяют развитие аутосомно-доминантной формы семейной гиперхолестеринемии. Ген PCSK9 кодирует фермент пропротеин конвертазу субтилизин/кексинового типа 9, участвующий в метаболизме липопротеинов низкой плотности (ЛНП) посредством пост-транскрипционной регуляции рецепторов ЛНП. Мутации «потери функции» гена PCSK9 приводят к низкой деградации рецепторов к ЛНП и снижению уровня холестерина ЛНП (ХС-ЛНП). Мутации «усиления функции» снижают количество рецепторов к ЛНП в печени, что приводит к высокому уровню ХС-ЛНП в крови и повышенному риску ИБС. Цель работы - выполнить анализ rs562556 и rs11591147 гена PCSK9 в российской популяции и в популяционных подвыборках лиц с гипер- и гипохолестеринемиями; изучить ассоциацию белка PCSK9 с rs562556 и rs11591147 гена PCSK9 на популяционном уровне. Материалы и методы: исследование выполнено на базе клинико-диагностического отделения Федерального государственного бюджетного научного учреждения Научно-исследовательский институт терапии и профилактической медицины. Проведено генотипирование rs562556 и rs11591147 гена PCSK9 в популяции; генотипирование rs562556 в подгруппе с гиперхолестеринемией; генотипирование rs11591147 в подгруппе с нормальными и низкими значениями уровня общего ХС. Подвыборки сформированы из репрезентативной выборки (9360 человек; 45-69 лет, средний возраст 53,8±7; мужчин и женщин 1:1) жителей города Новосибирска (международный проект «Факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний в Восточной Европе» HAPIEE, руководители в РФ - академик РАМН Никитин Ю.П., проф., д.м.н. Малютина С.К.). Исследование одобрено этическим комитетом «НИИТПМ». Уровни липидов в плазме определяли с помощью стандартных ферментативных анализов. Генотипирование rs11591147 гена PCSK9 было выполнено по оригинальной методике с использованием ПЦР-ПДРФ, с дальнейшим подтверждением методом прямого автоматического секвенирования. Генотипирование rs562556 гена PCSK9 выполнено методом РТ-ПЦР с использованием наборов «Синтол» (Россия). Статистическую обработку результатов проводили в программе SPSS for Windows. Результаты: Анализ ассоциации rs562556 с показателями липидного профиля крови и уровнем белка PCSK9 показал, что данный полиморфизм не вносит существенный вклад в формирование гиперхолестеринемии в европеоидной популяции Западной Сибири. Выявлена ассоциация мутации «потери функции» R46L (rs11591147) гена PCSK9 с уровнем ОХС в группе с нормальными и низкими значениями ОХС. Заключение: впервые в России определена частота аллелей и генотипов rs562556 и rs11591147 гена PCSK9 в популяции и в популяционных подвыборках лиц с гипер- и гипохолестеринемиями. Частота аллелей и генотипов соответствует европеоидным популяциям Северной и Западной Европы. Выявлена статистически значимая ассоциация редкого аллеля Т rs11591147 с низким уровнем ОХС.

семейная гиперхолестеринемия, ген пропротеин конвертазы субтилизин кексин тип 9, популяция

1. Libby P. Inflammation in atherosclerosis. Nature, 2002, 420(6917):868-874.

2. Roger V.L., Go A.S., Lloyd-Jones D.M. et al. Heart Disease and Stroke Statistics - 2011 Update: a report from the American Heart Association. // Circulation, 2011; 123: e18-e209.

3. Austin MA, Hutter CM, Zimmern RL, Humphries SE. Genetic causes of monogenic heterozygous familial hypercholesterolaemia: a HuGE prevalence review. Am J Epidemiol 2004;160:407-20.

4. Humphries S.E., Whittall R.A., Hubbart C.S., Maplebeck S. et al. Genetic causes of familial hypercholesterolaemia in patients in the UK: relation to plasma lipid levels and coronary heart disease risk. J MedGenet. 2006; 43 (12):943-949.

5. Marduel M., Carri A., Sassolas A., Devillers M., Carreau V., Di Filippo M.,Erlich D., Abifadel M., Marques-Pinheiro A., Munnich A., Junien C., The French ADH Research Network, Boileau C., Varret M. and Rab s J.P. Molecular Spectrum of Autosomal Dominant Hypercholesterolemia in France. HUMAN MUTATION Mutation in Brief 31: E1811-E1824 (2010) Online.

6. Poirier S, Mayer G, Poupon V, et al. Dissection of the endogenous cellular pathways of PCSK9-induced low density lipoprotein receptor degradation: evidence for an intracellular route. J Biol Chem. 2009; 284(42):28856- 28864.

7. В. В. Кухарчук, С. С. Бажан Пропротеин конвертаза субтилизин/кексин типа 9 (PCSK9) - ре-гулятор экспрессии рецепторов липопротеинов низкой плотности. Атеросклероз и Дислипидемии 2013 №2 (11), стр. 19-26. (V. V. Kukharchuk, S. S. Bajan Proprotein convertase subtilisin/keksin type 9 (PCSK9) - control the expression of low density lipoprotein receptor. The Journal of Atherosclerosis and Dyslipidemias 2013 №2 (11), p. 19-27).

8. Abifadel, M., Varret, M., Rabes, J.-P., Allard, D., Ouguerram, K., Devillers, M., Cruaud, C., Benjannet, S., Wickham, L., Erlich, D., Derre, A., Villeger, L., and 14 others. Mutations in PCSK9 cause autosomal dominant hypercholesterolemia. Nature Genet. 34: 154-156, 2003.

9. Abifadel M., Rabes J.P., Devillers M. at al. Mutations and polymorphisms in the proprotein convertase subtilisin kexin 9 (PCSK9) gene in cholesterol metabolism and disease. Hum Mutat 2009; 30:520-529.

10. R. Schulz, K.-D. Schluter, U. Laufs Molecular and cellular function of the proprotein convertase subtilisin/ kexin type 9 (PCSK9). Basic Res Cardiol 2015; 110:4.

11. Kotowski I. K., Pertsemlidis A., Luke A., Cooper R. S., Vega G. L., Cohen J. C., Hobbs H. H. 2006. A spectrum of PCSK9 alleles contributes to plasma levels of low-density lipoprotein cholesterol. Am. J. Hum. Genet. 78: 410-422

12. Parnell LD, Lee YC, Lai CQ. Adaptive genetic variation and heart disease risk. Curr Opin Lipidol. 2010 Apr;21(2):116-22.

13. Shioji K, Mannami T, Kokubo Y, Inamoto N, Takagi S, Goto Y, et al. Genetic variants in PCSK9 affect the cholesterol level in Japanese. J Hum Genet 2004;49(2):109-114.

14. Humphries SE, Neely RDG, Whittall RA, Troutt JS, Konrad RJ, Scartezini M, et al. Healthy individuals carrying the PCSK9 p.R46L variant and familial hypercholesterolemia patients carrying PCSK9 p.D374Y exhibit lower plasma concentrations of PCSK9. Clin Chem. 2009;55:2153-61.

15. Seidah N.G. The Proprotein Convertases, 20 Years Later. M. Mbikay, N.G. Seidah (eds.), Proprotein Convertases Chapter 3, Methods in Molecular Biology 768, 2011: 23-57.

16. M. Abifadel, S. Elbitar, P. El Khoury, Y. Ghaleb, M. Chémaly, M-L. Moussalli, J-P. Rabès, M. Varret, C. Boileau Living the PCSK9 Adventure: from the Identification of a New Gene in Familial Hypercholesterolemia Towards a Potential New Class of Anticholesterol Drugs. CurrAtheroscler Rep (2014) 16:439.

17. Postmus I, Trompet S, de Craen AJ, Buckley BM, Ford I, Stott DJ, Sattar N, Slagboom PE, Westendorp RG, Jukema JW. PCSK9 SNP rs11591147 is associated with low cholesterol levels but not with cognitive performance or noncardiovascular clinical events in an elderly population. J Lipid Res. 2013 Feb;54(2):561-6.