aterosklerozАтеросклерозAteroscleroz2078-256X2949-3633НИИТПМ-филиал ИЦиГ СО РАН10.15372/ATER20200408ateroskleroz-400Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESАнализ ассоциации rs9536314 гена KL с антропометрическими и биохимическими показателями у мужчин г. Новосибирска (западная сибирь)Analysis of association of rs9536314 of the KL gene with anthropometric and biochemical indicators in men of Novosibirsk (West Siberia)ТимощенкоО. В.TimoshchenkoO. V.

н.с. лаборатории молекулярно-генетических исследований терапевтических заболеваний

630089, Novosibirsk, Boris Bogatkov, 175/1

lentis@yandex.ruСемаевС. Е.SemaevS. E.

н.с. лаборатории молекулярно-генетических исследований терапевтических заболеваний

630089, Novosibirsk, Boris Bogatkov, 175/1

sse85@ngs.ruИванощукД. Е.IvanoshchukD. E.

н.с. лаборатории молекулярно-генетических исследований терапевтических заболеваний

630089, Novosibirsk, Boris Bogatkov, 175/1

dinara2084@mail.ruСтахневаЕ. М.StakhnevaE. M.

канд. биол. наук, с.н.с. лаборатории клинических биохимических и гормональных исследований терапевтических заболеваний

630089, Novosibirsk, Boris Bogatkov, 175/1

stahneva@yandex.ruНикитинЮ. П.NikitinYu. P.

д-р мед. наук, проф., академик РАН, рук. сектора аналитико-методологических проблем терапевтических заболеваний

630089, Novosibirsk, Boris Bogatkov, 175/1

yuri-nikitin@ngs.ruШахтшнейдерЕ. В.ShakhtshneiderE. V.

канд. мед. наук, в.н.с. лаборатории молекулярно-генетических исследований терапевтических заболеваний

630089, Novosibirsk, Boris Bogatkov, 175/1

2117409@mail.ruРагиноЮ. И.RaginoYu. I.

д-р мед. наук, проф., чл.-корр. РАН, рук.

630089, г. Новосибирск, ул. Бориса Богаткова, 175/1

630089, Novosibirsk, Boris Bogatkov, 175/1

ragino@mail.ruНИИ терапии и профилактической медицины – филиал ФГБУ ФИЦ Институт цитологии и генетики СО РАНResearch Institute of Internal and Preventive Medicine – Branch of Federal Research Center Institute of Cytology and Genetics of SB RAS2020050220211646169Copyright © Тимощенко О.В., Семаев С.Е., Иванощук Д.Е., Стахнева Е.М., Никитин Ю.П., Шахтшнейдер Е.В., Рагино Ю.И., 20212021Тимощенко О.В., Семаев С.Е., Иванощук Д.Е., Стахнева Е.М., Никитин Ю.П., Шахтшнейдер Е.В., Рагино Ю.И.Timoshchenko O.V., Semaev S.E., Ivanoshchuk D.E., Stakhneva E.M., Nikitin Y.P., Shakhtshneider E.V., Ragino Y.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://ateroskleroz.elpub.ru/jour/article/view/400

Цель исследования – определить частоту полиморфизма rs9536314 (F325V) гена KL иассоциацию данного варианта с рядом биохимических и антропометрических показателей у мужчин исследуемой группы и в европеоидной популяции Западной Сибири.

Материал и методы

Материал и методы. Исследуемая группа (69 мужчин, средний возраст 61,2±11,5  года) сформирована случайным образом из выборки лиц, обратившихся в клинику и поликлинику НИИТПМ – филиал ИЦиГ СО РАН и ГБУЗ НСО Госпиталь ветеранов воин ¹ 3 (178 мужчин, в возрасте 50–65 лет и старше 80 лет). Популяционная группа была случайным образом отобрана (219 человек) из выборки, опрошенной в рамках Международного многоцентрового проекта «Факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний в Восточной Европе» HAPIEE (9360 участников, 45–69 лет, средний возраст 53,8±7 лет, европеоиды > 90 %). Биохимические показатели определяли стандартными энзиматическими методами. Концентрацию в сыворотке крови белка Клото измеряли с помощью иммуноферментного метода. Геномную ДНК  амплифицировали с помощью полимеразной цепной реакции в стандартной реакционной смеси и далее гидролизовали рестриктазой TaqI B.

Результаты

Результаты. Частота генотипов (TT, TG и GG) и аллелей (T и G) rs9536314 гена KL в исследуемой группе соответствует данным в популяции Западной Сибири, а также в популяции Западной и Восточной Европы. Статистически значимых различий клинико-биохимических параметров в зависимости от генотипов rs9536314 гена KL в  исследуемой группе и в популяции не выявлено. В исследуемой группе уровень белка Клото в крови и скорость клубочковой фильтрации у мужчин с ишемической болезнью сердца и артериальной гипертонией не различаются в аутосомно-доминантной и аутосомно-рецессивной моделях для rs9536314 гена KL.

Заключение

Заключение. Частота полиморфизма rs9536314 гена KL в исследуемой группе соответствует частоте полиморфизма rs9536314 гена KL в европеоидной популяции  Западной Сибири. Биохимические и антропометрические показатели, а также содержание белка Клото не имеют статистически значимых различий в зависимости от генотипов rs9536314 гена KL у обследованных мужчин. 

Purpose of the study

Purpose of the study. To determine the frequency of the rs9536314 (F325V) polymorphism of the KL gene and the association of this variant with a number of biochemical and anthropometric parameters in men of the study group and in the Caucasian population of Western Siberia.

Materials and methods

Materials and methods. The study group (69 men, average age 61.2 ±11.5 years) was randomly formed  from a sample of persons who applied to the clinic and polyclinic of NIITPM - a branch of the ICG SB RAS and GBUZ NSO Hospital of war veterans No. 3 (178 men, aged 50-65 years old and over 80 years old). The population group was randomly selected (219 people) from the sample surveyed within the framework of the International Multicenter Project "Risk Factors for Cardiovascular Diseases in Eastern Europe" HAPIEE (9360 participants, 45–69 years old, mean age 53.8±7 years old, Caucasians > 90 %). Biochemical parameters were determined by standard enzymatic methods. Serum concentration of Klotho protein was measured by ELISA. Genomic DNA was amplified by polymerase chain reaction in a standard reaction mixture and further digested with TaqI B restriction enzyme.

Results

Results. The frequency of genotypes (TT, TG, and GG) and alleles (T and G) rs9536314 of the KL gene in the study group corresponds to the data in the population of Western Siberia, as well as the population of Western and Eastern Europe. There were no statistically significant differences in the mean values of the studied clinical and biochemical parameters depending on the rs9536314 genotypes of the KL gene in the study group and in the population. In the study group, the level of Klotho protein in the blood and the glomerular filtration rate in men with coronary heart disease and arterial hypertension did not differ in the autosomal dominant and autosomal recessive models for the rs9536314 KL gene.

Conclusion

Conclusion. Thus, the frequency of the rs9536314 polymorphism of the KL gene in the study group corresponds to the frequency of the rs9536314 polymorphism of the KL gene in the Caucasian population of Western Siberia. Biochemical and anthropometric parameters, as well as the Klotho protein, do not have statistically significant differences depending on the genotypes of rs9536314 of the KL gene in the examined men. 

ген Клотоrs9536314ишемическая болезнь сердцапопуляция Западной СибириKlotho geners9536314ischemic heart diseasepopulation of Western SiberiaРабота по формированию выборки и клинико-биохимические исследова- ния выполнены в рамках государственного за- дания ¹ АААА-А17-117112850280-2, молекуляр- но-генетический анализ выполнен при финан- совой поддержке гранта Президента Российской Федерации для ведущих научных школ ¹ НШ- 2595.2020.7.ReferencesKuro-o M., Matsumura Y., Aizawa H. Kawaguchi H., Suga T., Utsugi T., Ohyama Y., Kurabayashi M., Kaname T., Kume E., Iwasaki H., Iida A., Shiraki-Iida T., Nishikawa S., Nagai R., Nabeshima Y.I. Mutation of the mouse Klotho gene leads to a syndrome resembling ageing. Nature, 1997; 390 (6655): 45–51. doi: 10.1038/36285Kuro-o M., Matsumura Y., Aizawa H. Kawaguchi H., Suga T., Utsugi T., Ohyama Y., Kurabayashi M., Kaname T., Kume E., Iwasaki H., Iida A., Shiraki-Iida T., Nishikawa S., Nagai R., Nabeshima Y.I. Mutation of the mouse Klotho gene leads to a syndrome resembling ageing. Nature, 1997; 390 (6655): 45–51. doi: 10.1038/36285Matsumura Y., Aizawa H., Shiraki-Iida T. Nagai R., Kuro-o M., Nabeshima Y. Identification of the human Klotho gene and its two transcripts encoding membrane and secreted Klotho protein. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1998; 242 (3): 626–630. doi: 10.1006/bbrc.1997.8019Matsumura Y., Aizawa H., Shiraki-Iida T. Nagai R., Kuro-o M., Nabeshima Y. Identification of the human Klotho gene and its two transcripts encoding membrane and secreted Klotho protein. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1998; 242 (3): 626–630. doi: 10.1006/bbrc.1997.8019Kurosu H., Yamamoto M., Clark J.D., Pastor J.V., Nandi A., Gurnani P., McGuinness O.P., Chikuda H., Yamaguchi M., Kawaguchi H., Shimomura I., Takayama Y., Herz J., Kahn C.R., Rosenblatt K.P., Kuro-o M. Suppression of aging in mice by the hormone Klotho. Science, 2005; 309 (5742), 1829–1833. doi: 10.1126/science.1112766Kurosu H., Yamamoto M., Clark J.D., Pastor J.V., Nandi A., Gurnani P., McGuinness O.P., Chikuda H., Yamaguchi M., Kawaguchi H., Shimomura I., Takayama Y., Herz J., Kahn C.R., Rosenblatt K.P., Kuro-o M. Suppression of aging in mice by the hormone Klotho. Science, 2005; 309 (5742), 1829–1833. doi: 10.1126/science.1112766Li S.A., Watanabe M., Yamada H., Nagai A, Kinuta M, Takei K. Immunohistochemical localization of Klotho protein in brain, kidney, and reproductive organs of mice. Cell Struct. Funct., 2004; 29 (4): 91–99. doi: 10.1247/csf.29.91Li S.A., Watanabe M., Yamada H., Nagai A, Kinuta M, Takei K. Immunohistochemical localization of Klotho protein in brain, kidney, and reproductive organs of mice. Cell Struct. Funct., 2004; 29 (4): 91–99. doi: 10.1247/csf.29.91Arking D.E., Krebsova A., Macek M.Sr., Macek M.Jr., Arking A., Mian I.S., Fried L., Hamosh A., Dey S., McIntosh I., Dietz H.C. Association of human aging with a functional variant of Klotho. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2002; 99 (2): 856–861. doi: 10.1073/pnas.022484299Arking D.E., Krebsova A., Macek M.Sr., Macek M.Jr., Arking A., Mian I.S., Fried L., Hamosh A., Dey S., McIntosh I., Dietz H.C. Association of human aging with a functional variant of Klotho. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2002; 99 (2): 856–861. doi: 10.1073/pnas.022484299Shardell M., Semba R.D., Rosano C., Kalyani R.R., Bandinelli S., Chia C.W. L plasma Klotho and cognitive decline in older adults: findings from the InCHIANTI study. J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci., 2016; 71 (5): 677–682. doi: 10.1093/gerona/glv140Shardell M., Semba R.D., Rosano C., Kalyani R.R., Bandinelli S., Chia C.W. L plasma Klotho and cognitive decline in older adults: findings from the InCHIANTI study. J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci., 2016; 71 (5): 677–682. doi: 10.1093/gerona/glv140Prather A.A., Epel E.S., Arenander J., Broestl L., Garay B.I., Wang D., Dubal D.B. Longevity factor klotho and chronic psychological stress. Transl. Psychiatry, 2015; 5 (6): e585. doi: 10.1038/tp.2015.81Prather A.A., Epel E.S., Arenander J., Broestl L., Garay B.I., Wang D., Dubal D.B. Longevity factor klotho and chronic psychological stress. Transl. Psychiatry, 2015; 5 (6): e585. doi: 10.1038/tp.2015.81Dubal D.B., Zhu L., Sanchez P.E., Worden K., Broestl L., Johnson E., Ho K., Yu G.Q., Kim D., Betourne A., Kuro-O M., Masliah E., Abraham C.R., Mucke L. Life extension factor Klotho prevents mortality and enhances cognition in hAPP transgenicDubal D.B., Zhu L., Sanchez P.E., Worden K., Broestl L., Johnson E., Ho K., Yu G.Q., Kim D., Betourne A., Kuro-O M., Masliah E., Abraham C.R., Mucke L. Life extension factor Klotho prevents mortality and enhances cognition in hAPP transgenicmice. J. Neurosci., 2015; 35 (6): 2358–2371. doi: 10.1523/JNEUROSCI.5791-12.2015mice. J. Neurosci., 2015; 35 (6): 2358–2371. doi: 10.1523/JNEUROSCI.5791-12.2015Abulizi P., Zhou X.-H., Keyimu K., Luo M., Jin F.-Q. Correlation between Klotho gene and mild cognitive impairment in the Uygur and Han populations of Xinjiang. Oncotarget, 2017; 8 (43): 75174–75185. doi: 10.18632/oncotarget.20655Abulizi P., Zhou X.-H., Keyimu K., Luo M., Jin F.-Q. Correlation between Klotho gene and mild cognitive impairment in the Uygur and Han populations of Xinjiang. Oncotarget, 2017; 8 (43): 75174–75185. doi: 10.18632/oncotarget.20655Deary I.J., Harris S.E., Fox H.C., Hayward C., Wright A.F., Starr J.M., Whalley L.J. Klotho genotype and cognitive ability in childhood and old age in the same individuals. Neurosci. Lett., 2005; 378 (1): 22–27. doi: 10.1016/j.neulet.2004.12.005Deary I.J., Harris S.E., Fox H.C., Hayward C., Wright A.F., Starr J.M., Whalley L.J. Klotho genotype and cognitive ability in childhood and old age in the same individuals. Neurosci. Lett., 2005; 378 (1): 22–27. doi: 10.1016/j.neulet.2004.12.005Mengel-From J., Soerensen M., Nygaard M., McGue M., Christensen K., Christiansen L. Genetic variants in Klotho associate with cognitive function in the oldest old group. J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci., 2016; 71 (9): 1151–1159. doi: 10.1093/gerona/glv163Mengel-From J., Soerensen M., Nygaard M., McGue M., Christensen K., Christiansen L. Genetic variants in Klotho associate with cognitive function in the oldest old group. J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci., 2016; 71 (9): 1151–1159. doi: 10.1093/gerona/glv163Marchelek-Myśliwiec M., Różański J., Ogrodowczyk A., Dutkiewicz G., Dołęgowska B., Sałata D., Budkowska M., Safranow K., Stępniewska J., Wiśniewska M., Ciechanowski K. The association of the Klotho polymorphism rs9536314 with parameters of calciumphosphate metabolism in patients on long-term hemodialysis. Ren. Fail., 2016; 38 (5): 776–780. doi: 10.3109/0886022X.2016.1162062Marchelek-Myśliwiec M., Różański J., Ogrodowczyk A., Dutkiewicz G., Dołęgowska B., Sałata D., Budkowska M., Safranow K., Stępniewska J., Wiśniewska M., Ciechanowski K. The association of the Klotho polymorphism rs9536314 with parameters of calciumphosphate metabolism in patients on long-term hemodialysis. Ren. Fail., 2016; 38 (5): 776–780. doi: 10.3109/0886022X.2016.1162062Arking D.E., Becker D.M., Yanek L.R., Fallin D., Judge D.P., Moy T.F., Becker L.C., Dietz H.C. Klotho allele status and the risk of early-onset occult coronary artery disease. Am. J. Hum. Genet., 2003; 72 (5): 1154–1161. doi: 10.1086/375035Arking D.E., Becker D.M., Yanek L.R., Fallin D., Judge D.P., Moy T.F., Becker L.C., Dietz H.C. Klotho allele status and the risk of early-onset occult coronary artery disease. Am. J. Hum. Genet., 2003; 72 (5): 1154–1161. doi: 10.1086/375035Yokoyama J.S., Sturm V.E., Bonham L.W., Klein E., Arfanakis K., Yu L., Coppola G., Kramer J.H., Bennett D.A., Miller B.L., Dubal D.B. Variation in longevity gene Klotho is associated with greater cortical volumes. Ann. Clin. Transl. Neurol, 2015; 2 (3): 215–230. doi: 10.1002/acn3.161Yokoyama J.S., Sturm V.E., Bonham L.W., Klein E., Arfanakis K., Yu L., Coppola G., Kramer J.H., Bennett D.A., Miller B.L., Dubal D.B. Variation in longevity gene Klotho is associated with greater cortical volumes. Ann. Clin. Transl. Neurol, 2015; 2 (3): 215–230. doi: 10.1002/acn3.161Arking D.E., Atzmon G., Arking A., Barzilai N., Dietz H.C. Association between a functional variant of the Klotho gene and high-density lipoprotein cholesterol, blood pressure, stroke, and longevity. Circ. Res., 2005; 96 (4): 412–418. doi: 10.1161/01.RES.0000157171.04054.30Arking D.E., Atzmon G., Arking A., Barzilai N., Dietz H.C. Association between a functional variant of the Klotho gene and high-density lipoprotein cholesterol, blood pressure, stroke, and longevity. Circ. Res., 2005; 96 (4): 412–418. doi: 10.1161/01.RES.0000157171.04054.30Zhu Z., Xia W., Cui Y., Zeng F., Li Y., Yang Z., Hequn C. Klotho gene polymorphisms are associated with healthy aging and longevity: Evidence from a meta-analysis. Mech. Ageing Dev, 2019; 178: 33–40. doi:10.1016/j.mad.2018.12.003Zhu Z., Xia W., Cui Y., Zeng F., Li Y., Yang Z., Hequn C. Klotho gene polymorphisms are associated with healthy aging and longevity: Evidence from a meta-analysis. Mech. Ageing Dev, 2019; 178: 33–40. doi:10.1016/j.mad.2018.12.003Adzhubei I.A., Schmidt S., Peshkin L., Ramensky V.E., Gerasimova A., Bork P., Kondrashov A.S., Sunyaev S.R. A method and server for predicting damaging missense mutations. Nat. Methods, 2010; 7 (4): 248–249. doi: 10.1038/nmeth0410-248Adzhubei I.A., Schmidt S., Peshkin L., Ramensky V.E., Gerasimova A., Bork P., Kondrashov A.S., Sunyaev S.R. A method and server for predicting damaging missense mutations. Nat. Methods, 2010; 7 (4): 248–249. doi: 10.1038/nmeth0410-248Peasey A., Bobak M., Kubinova R., Malyutina S.K., Pajak A., Tamosiunas A., Pikhart H., Nicholson A., Marmot M. Determinants of cardiovascular disease and other non-communicable diseases in Central and Eastern Europe: Rationale and Design of the HAPIEE study. BMC Public Health, 2006; (6): 255–264. doi: 10.1186/1471-2458-6-255Peasey A., Bobak M., Kubinova R., Malyutina S.K., Pajak A., Tamosiunas A., Pikhart H., Nicholson A., Marmot M. Determinants of cardiovascular disease and other non-communicable diseases in Central and Eastern Europe: Rationale and Design of the HAPIEE study. BMC Public Health, 2006; (6): 255–264. doi: 10.1186/1471-2458-6-255Sambrook J., Russell D.W. Purification of nucleic acids by extraction with phenol:chloroform. CSH Protoc. 2006; (1): pdb.prot4455. doi: 10.1101/pdb.prot4455Sambrook J., Russell D.W. Purification of nucleic acids by extraction with phenol:chloroform. CSH Protoc. 2006; (1): pdb.prot4455. doi: 10.1101/pdb.prot4455Тимощенко О.В., Рагино Ю.И., Стахнева Е.М., Каштанова Е.В., Никитин Ю.П. Белок Клото в крови у мужчин с ишемической болезнью сердца и его ассоциации с липидным профилем. Атеросклероз, 2020; 16 (1): 5–8. doi.org/10.15372/ATER20200101Тимощенко О.В., Рагино Ю.И., Стахнева Е.М., Каштанова Е.В., Никитин Ю.П. Белок Клото в крови у мужчин с ишемической болезнью сердца и его ассоциации с липидным профилем. Атеросклероз, 2020; 16 (1): 5–8. doi.org/10.15372/ATER20200101Тимощенко О.В., Стахнева Е.М., Рагино Ю.И., Никитин Ю.П. Особенности содержания белка Клото в крови у мужчин с артериальной гипертонией и его ассоциации с кардиометаболическими факторами риска. Комплексные проблемы сердечно-сосудистых заболеваний, 2020; 9 (4): 21–31. https://doi.org/10.17802/2306-1278-2020-9-4-21-31Тимощенко О.В., Стахнева Е.М., Рагино Ю.И., Никитин Ю.П. Особенности содержания белка Клото в крови у мужчин с артериальной гипертонией и его ассоциации с кардиометаболическими факторами риска. Комплексные проблемы сердечно-сосудистых заболеваний, 2020; 9 (4): 21–31. https://doi.org/10.17802/2306-1278-2020-9-4-21-31Aizawa H., Saito Y., Nakamura T., Inoue M., Imanari T., Ohyama Y., Matsumura Y., Masuda H., Oba S., Mise N., Kimura K., Hasegawa A., Kurabayashi M., Kuro-o M., Nabeshima Y., Nagai R. Downregulation of the Klotho gene in the kidney under sustained circulatory stress in rats. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1998; 249 (3): 865–871. doi: 10.1006/bbrc.1998.9246Aizawa H., Saito Y., Nakamura T., Inoue M., Imanari T., Ohyama Y., Matsumura Y., Masuda H., Oba S., Mise N., Kimura K., Hasegawa A., Kurabayashi M., Kuro-o M., Nabeshima Y., Nagai R. Downregulation of the Klotho gene in the kidney under sustained circulatory stress in rats. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1998; 249 (3): 865–871. doi: 10.1006/bbrc.1998.9246Nagai R., Saito Y., Ohyama Y., Aizawa H., Suga T., Nakamura T., Kurabayashi M., Kuroo M. Endothelial dysfunction in the Klotho mouse and downregulation of klotho gene expression in various animal models of vascular and metabolic diseases. Cell. Mol. Life Sci., 2000; 57 (5): 738–746. doi: 10.1007/s000180050038Nagai R., Saito Y., Ohyama Y., Aizawa H., Suga T., Nakamura T., Kurabayashi M., Kuroo M. Endothelial dysfunction in the Klotho mouse and downregulation of klotho gene expression in various animal models of vascular and metabolic diseases. Cell. Mol. Life Sci., 2000; 57 (5): 738–746. doi: 10.1007/s000180050038Mitani H., Ishizaka N., Aizawa T., Ohno M., Usui S., Suzuki T., Amaki T., Mori I., Nakamura Y., Sato M., Nangaku M., Hirata Y., Nagai R. In vivo Klotho gene transfer ameliorates angiotensin II-induced renal damage. Hypertension, 2002; 39 (4): 838–843. doi: 10.1161/01.hyp.0000013734.33441.eaMitani H., Ishizaka N., Aizawa T., Ohno M., Usui S., Suzuki T., Amaki T., Mori I., Nakamura Y., Sato M., Nangaku M., Hirata Y., Nagai R. In vivo Klotho gene transfer ameliorates angiotensin II-induced renal damage. Hypertension, 2002; 39 (4): 838–843. doi: 10.1161/01.hyp.0000013734.33441.eaBrunner H.R. Experimental and clinical evidence that angiotensin II is an independent risk factor for cardiovascular disease. Am. J. Cardiol., 2001; 87 (8A): 3C–9C. doi: 10.1016/s0002-9149(01)01538-7Brunner H.R. Experimental and clinical evidence that angiotensin II is an independent risk factor for cardiovascular disease. Am. J. Cardiol., 2001; 87 (8A): 3C–9C. doi: 10.1016/s0002-9149(01)01538-7Gavras I., Gavras H. Angiotensin II as a cardiovascular risk factor. J. Hum. Hypertens., 2002; 16 (Suppl. 2): S2–S6. doi: 10.1038/sj.jhh.1001392Gavras I., Gavras H. Angiotensin II as a cardiovascular risk factor. J. Hum. Hypertens., 2002; 16 (Suppl. 2): S2–S6. doi: 10.1038/sj.jhh.1001392Saito Y., Yamagishi T., Nakamura T., Ohyama Y., Aizawa H., Suga T., Matsumura Y., Masuda H., Kurabayashi M., Kuro-o M., Nabeshima Y., Nagai R. Klotho protein protects against endothelial dysfunction. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1998; 248 (2): 324–329. doi: 10.1006/bbrc.1998.8943Saito Y., Yamagishi T., Nakamura T., Ohyama Y., Aizawa H., Suga T., Matsumura Y., Masuda H., Kurabayashi M., Kuro-o M., Nabeshima Y., Nagai R. Klotho protein protects against endothelial dysfunction. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1998; 248 (2): 324–329. doi: 10.1006/bbrc.1998.8943Saito Y., Nakamura T., Ohyama Y., Suzuki T., Iida A., Shiraki-Iida T., Kuro-o M., Nabeshima Y., Kurabayashi M., Nagai R. In vivo Klotho gene delivery protects against endothelial dysfunction in multiple risk factor syndrome. Biochem. Biophys. Res. Commun., 2000; 276 (2): 767–772. doi: 10.1006/bbrc.2000.3470Saito Y., Nakamura T., Ohyama Y., Suzuki T., Iida A., Shiraki-Iida T., Kuro-o M., Nabeshima Y., Kurabayashi M., Nagai R. In vivo Klotho gene delivery protects against endothelial dysfunction in multiple risk factor syndrome. Biochem. Biophys. Res. Commun., 2000; 276 (2): 767–772. doi: 10.1006/bbrc.2000.3470Fukino K., Suzuki T., Saito Y., Shindo T., Amaki T., Kurabayashi M., Nagai R. Regulation of angiogenesis by the aging suppressor gene Klotho. Biochem. Biophys. Res. Commun., 2002; 293 (1): 332–337. doi: 10.1016/S0006-291X(02)00216-4Fukino K., Suzuki T., Saito Y., Shindo T., Amaki T., Kurabayashi M., Nagai R. Regulation of angiogenesis by the aging suppressor gene Klotho. Biochem. Biophys. Res. Commun., 2002; 293 (1): 332–337. doi: 10.1016/S0006-291X(02)00216-4Yuhanna I.S., Zhu Y., Cox B.E., Hahner L.D., Osborne-Lawrence S., Lu P., Marcel Y.L., Anderson R.G., Mendelsohn M.E., Hobbs H.H., Shaul P.W. High-density lipoprotein binding to scavenger receptor-BI activates endothelial nitric oxide synthase. Nat. Med., 2001; 7 (7): 853–857. doi: 10.1038/89986Yuhanna I.S., Zhu Y., Cox B.E., Hahner L.D., Osborne-Lawrence S., Lu P., Marcel Y.L., Anderson R.G., Mendelsohn M.E., Hobbs H.H., Shaul P.W. High-density lipoprotein binding to scavenger receptor-BI activates endothelial nitric oxide synthase. Nat. Med., 2001; 7 (7): 853–857. doi: 10.1038/89986Kuvin J.T., Rämet M.E., Patel A.R., Pandian N.G., Mendelsohn M.E., Karas R.H. A novel mechanism for the beneficial vascular effects of high-density lipoprotein cholesterol: enhanced vasorelaxation and increased endothelial nitric oxide synthase expression. Am. Heart J., 2002; 144 (1): 165–172. doi: 10.1067/mhj.2002.123145Kuvin J.T., Rämet M.E., Patel A.R., Pandian N.G., Mendelsohn M.E., Karas R.H. A novel mechanism for the beneficial vascular effects of high-density lipoprotein cholesterol: enhanced vasorelaxation and increased endothelial nitric oxide synthase expression. Am. Heart J., 2002; 144 (1): 165–172. doi: 10.1067/mhj.2002.123145

The authors declare that there are no conflicts of interest present.